髓鞘是白色脂肪、無生命的物質(zhì)存在于神經(jīng)纖維周圍形成一個絕緣和保護作用的鞘。臘克沙固藍(Luxol fast blue),又稱羅克沙爾堅牢藍或溶劑藍38,深藍青色粉末。系一種酞菁銅的磺酸二芳基胍鹽(diarylquanidine salt of a sulphonated copper phthalocyanine)。通過酸堿反應(yīng)形成鹽的過程,由脂蛋白的堿性成分取代染料的堿性成分,達到染色的目的,特異性地針對含有磷脂的髓鞘質(zhì)。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A) 毫升(自備)
HEPENGBIO補水液A(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO補水液B(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO補水液C(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO補水液D(Reagent E) 毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent F) 毫升
HEPENGBIO平衡液(Reagent G) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照,瓶口密閉;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證3月
用戶自備
小型玻璃染色缸:用于石蠟切片的脫蠟和染色操作
培養(yǎng)箱:用于切片染色孵育
中性樹脂:用于切片封片
光學顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實驗步驟
一、 脫蠟處理
1. 取出10片待測的10微米厚的石蠟包埋的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,此步很重要)
2. (選擇步驟)放進80℃烘箱,孵育30分鐘
3. (選擇步驟)室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進小染色缸里孵育
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
6. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液A(Reagent B)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液A(Reagent B)
二、 樣本染色處理
1. 準備1個50或100毫升小型染色缸
2. 加入適量的HEPENGBIO染色液(Reagent F)到小型染色缸里
3. 小心放進上述脫蠟處理的切片(注意:確保切片浸泡在HEPENGBIO染色液(Reagent F))
4. 置于60℃培養(yǎng)箱里孵育16小時,避免光照(注意:參見注意事項8和9)
5. 取出切片,小心移去切片上的HEPENGBIO染色液(Reagent F)
6. 室溫下,小心將切片置入新的xx毫升HEPENGBIO補水液A(Reagent B)中5次(2秒/次)
7. 輕輕移去切片上的HEPENGBIO補水液A(Reagent B),或空氣中晾干
8. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
9. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
10. 小心加上xx微升HEPENGBIO平衡液(Reagent G)
11. 室溫下孵育30秒
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO平衡液(Reagent G)
13. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液B(Reagent C)
14. 室溫下孵育30秒
15. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液B(Reagent C)
16. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
17. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
18. 重復實驗步驟13至17,直至可見藍色(白質(zhì))和灰色(灰質(zhì))的對比差異
19. (選擇步驟)進行復染操作(建議使用HEPENGBIO甲苯酚紫(CRESYL VIOLET)復染試劑盒-HEPENGBIO80052)
20. 放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
21. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:
神經(jīng)髓鞘質(zhì)或髓鞘質(zhì)包裹的神經(jīng)纖維呈現(xiàn)藍色/綠色,
如果復染,神經(jīng)元呈現(xiàn)粉紅色或紫色
注意事項
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
4. 建議使用玻璃染色缸
5. 石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,否則造成樣品支離破碎
6. 每次更換試劑溶液時,保持切片面基本晾干
7. 試劑溶液在切片表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿切片表面
8. HEPENGBIO染色液(Reagent F)避免光照
9. 染色時,染色缸須密閉,至關(guān)重要
10. 染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察
11. 樣品染色后保存,避免光照
12. 本公司提供系列組織細胞神經(jīng)系統(tǒng)成分染色試劑產(chǎn)品
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A) 毫升(自備)
HEPENGBIO補水液A(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO補水液B(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO補水液C(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO補水液D(Reagent E) 毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent F) 毫升
HEPENGBIO平衡液(Reagent G) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照,瓶口密閉;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證3月
用戶自備
小型玻璃染色缸:用于石蠟切片的脫蠟和染色操作
培養(yǎng)箱:用于切片染色孵育
中性樹脂:用于切片封片
光學顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實驗步驟
一、 脫蠟處理
1. 取出10片待測的10微米厚的石蠟包埋的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,此步很重要)
2. (選擇步驟)放進80℃烘箱,孵育30分鐘
3. (選擇步驟)室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進小染色缸里孵育
染色缸 | 孵育時間 |
xx毫升HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A) | 15分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A) | 15分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A) | 15分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液A(Reagent B) | 3分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液B(Reagent C) | 3分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液C(Reagent D) | 3分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液D(Reagent E) | 3分鐘 |
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
6. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液A(Reagent B)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液A(Reagent B)
二、 樣本染色處理
1. 準備1個50或100毫升小型染色缸
2. 加入適量的HEPENGBIO染色液(Reagent F)到小型染色缸里
3. 小心放進上述脫蠟處理的切片(注意:確保切片浸泡在HEPENGBIO染色液(Reagent F))
4. 置于60℃培養(yǎng)箱里孵育16小時,避免光照(注意:參見注意事項8和9)
5. 取出切片,小心移去切片上的HEPENGBIO染色液(Reagent F)
6. 室溫下,小心將切片置入新的xx毫升HEPENGBIO補水液A(Reagent B)中5次(2秒/次)
7. 輕輕移去切片上的HEPENGBIO補水液A(Reagent B),或空氣中晾干
8. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
9. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
10. 小心加上xx微升HEPENGBIO平衡液(Reagent G)
11. 室溫下孵育30秒
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO平衡液(Reagent G)
13. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液B(Reagent C)
14. 室溫下孵育30秒
15. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液B(Reagent C)
16. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
17. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
18. 重復實驗步驟13至17,直至可見藍色(白質(zhì))和灰色(灰質(zhì))的對比差異
19. (選擇步驟)進行復染操作(建議使用HEPENGBIO甲苯酚紫(CRESYL VIOLET)復染試劑盒-HEPENGBIO80052)
20. 放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
21. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:
神經(jīng)髓鞘質(zhì)或髓鞘質(zhì)包裹的神經(jīng)纖維呈現(xiàn)藍色/綠色,
如果復染,神經(jīng)元呈現(xiàn)粉紅色或紫色
注意事項
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
4. 建議使用玻璃染色缸
5. 石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,否則造成樣品支離破碎
6. 每次更換試劑溶液時,保持切片面基本晾干
7. 試劑溶液在切片表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿切片表面
8. HEPENGBIO染色液(Reagent F)避免光照
9. 染色時,染色缸須密閉,至關(guān)重要
10. 染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察
11. 樣品染色后保存,避免光照
12. 本公司提供系列組織細胞神經(jīng)系統(tǒng)成分染色試劑產(chǎn)品