氨基糖類（amino sugar）是一類含有氨基替代羥基的糖，目前發(fā)現(xiàn)有60多種，例如氨基葡萄糖（glucosamine）、氨基半乳糖（galactosamine），以及衍生物乙酰基氨基葡萄糖（acetylglucosamine）、唾液酸（sialic acid），和抗菌化合物氨基糖苷（aminoglycoside）等。氨基糖類是地球上最古老和最豐富的有機化合物之一。其中氨基葡萄糖是糖基化蛋白生物合成的前體，甲殼綱動物（crustacean）體外骨骼和真菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分。自然存在于動物骨組織、骨髓、真菌細(xì)胞壁和貝類動物殼上。作為食物補充劑，有助于關(guān)節(jié)的結(jié)構(gòu)和功能，尤其是骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis）患者。氨基半乳糖是糖蛋白類激素，例如卵泡刺激素（follicle stimulating hormone；FSH）、促黃體激素（luteinizing hormone；LH）的成分，具有肝毒性。在堿性條件下，通過加熱處理，形成顯色素（chromogen），進而與歐立希試劑（Ehrlich’s reagent），即酸性對二甲基氨基苯甲醛（N,N-dimethyl p-aminobenzaldehyde）反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色復(fù)合物，在分光光度儀（530nm 波長）下出現(xiàn)吸光峰值的變化，來定量測定樣品中氨基糖類量的總含量。 
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO堿性液（Reagent A）     毫升
HEPENGBIO反應(yīng)液（Reagent B）     毫升
HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）     微升
產(chǎn)品說明書     1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里；試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證3月
 
用戶自備
 
1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品配制和反應(yīng)的容器
15毫升錐形離心管：用于樣品反應(yīng)操作的容器
沸水裝置：用于反應(yīng)孵育
比色皿：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
實驗步驟
 
一、標(biāo)準(zhǔn)樣品配制
 
1． 準(zhǔn)備好4個1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號管
2． 分別加入xx微升HEPENGBIO堿性液（Reagent A）到每個離心管
3． 移取xx微升HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到1號管，混勻
4． 小心移取xx微升1號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到2號管，混勻
5． 小心移取xx微升2號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到3號管，混勻
6． 將1至4號管放進冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表
 

管號	HEPENGBIO 標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）	HEPENGBIO堿性液（Reagent A）	測定體系中 標(biāo)準(zhǔn)氨基葡萄糖含量
1	xx微升	xx微升	xx微克
2	xx微升1號管	xx微升	xx微克
3	xx微升2號管	xx微升	xx微克
4	——	xx微升	0

 
二、 樣品測定
 
1． 設(shè)定好分光光度儀：波長530nm，并置零
2． 分別移取xx毫升HEPENGBIO堿性液（Reagent A）到15毫升離心管
3． 分別加入20微升上述制備的標(biāo)準(zhǔn)樣品或待測樣品，混勻
4． 沸水煮沸1小時
5． 分別加入xx毫升HEPENGBIO反應(yīng)液（Reagent B），混勻
6． 室溫下冷卻10分鐘，避免光照
7． 轉(zhuǎn)移到新的比色皿
8． 即刻放進分光光度儀檢測（530nm波長）：獲得吸光讀數(shù)
9． 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為吸光讀數(shù)；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)氨基葡萄糖含量（微克）
10． 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)氨基葡萄糖含量（微克）
11． 計算樣品實際氨基糖類濃度（微克/毫升）