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作為RNA染色劑之一的RiboGreen熒光染料與樣品中RNA，包括rRNA、mRNA等結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號。RiboGreen可以檢測到低達(dá)1納克RNA的變化。RNA的微量增加引起熒光信號強(qiáng)度（Intensity）或相對熒光單位（RFU）的顯著增加。其自發(fā)熒光（Autofluorescence）忽略不計，重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差異（Standard Deviation）低，不受樣品化學(xué)成分的干擾。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO染色液（Reagent A） 微升
HEPENGBIO稀釋液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C） 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里，HEPENGBIO染色液（Reagent A）避免光照，有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器
200微升1厘米光徑比色皿或黑色96孔板：用于熒光分析的容器
熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：用于熒光定量分析
實(shí)驗步驟
一、 測定準(zhǔn)備
1． 準(zhǔn)備好待測樣品，置于冰槽里
2． 設(shè)定好熒光分光光度儀：激發(fā)波長485±10nm，散發(fā)波長530±12.5nm，并置零
3． 實(shí)驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的HEPENGBIO染色液（Reagent A）置于冰槽里融化。然后移出xx微升HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent A），混勻后，用錫紙包裹，標(biāo)記為HEPENGBIO染色工作液（5次測定量），放在暗室里。然后進(jìn)行下列操作。
二、 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線
1． 準(zhǔn)備好5個1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號管
2． 分別加入xx微升HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）到每個離心管
3． 移取xx微升HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到1號管，混勻
4． 小心移取xx微升1號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到2號管，混勻
5． 小心移取xx微升2號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到3號管，混勻
6． 小心移取xx微升3號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到4號管，混勻
7． 將1至5號管放進(jìn)冰槽里備用；標(biāo)準(zhǔn)管含量見下表
8． 移取xx微升含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）的HEPENGBIO染色工作液到新的比色皿
9． 加入100微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液
10． 室溫下，孵育5分鐘，避免光照
11． 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀測讀：獲得相對熒光單位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
12． 重復(fù)實(shí)驗步驟8至11四次
13． 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對熒光單位（RLU）；橫坐標(biāo)（X軸）為DNA含量（納克/毫升）
三、 樣品檢測
1． 移取xx微升含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）的HEPENGBIO染色工作液到新的比色皿
2． 加入100微升待測樣品
3． 室溫下，孵育5分鐘，避免光照
4． 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀測讀：獲得相對熒光單位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
5． 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)RNA含量（納克/毫升）
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO染色液（Reagent A） 微升
HEPENGBIO稀釋液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C） 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里，HEPENGBIO染色液（Reagent A）避免光照，有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器
200微升1厘米光徑比色皿或黑色96孔板：用于熒光分析的容器
熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：用于熒光定量分析
實(shí)驗步驟
一、 測定準(zhǔn)備
1． 準(zhǔn)備好待測樣品，置于冰槽里
2． 設(shè)定好熒光分光光度儀：激發(fā)波長485±10nm，散發(fā)波長530±12.5nm，并置零
3． 實(shí)驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的HEPENGBIO染色液（Reagent A）置于冰槽里融化。然后移出xx微升HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent A），混勻后，用錫紙包裹，標(biāo)記為HEPENGBIO染色工作液（5次測定量），放在暗室里。然后進(jìn)行下列操作。
二、 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線
1． 準(zhǔn)備好5個1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號管
2． 分別加入xx微升HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）到每個離心管
3． 移取xx微升HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到1號管，混勻
4． 小心移取xx微升1號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到2號管，混勻
5． 小心移取xx微升2號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到3號管，混勻
6． 小心移取xx微升3號管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到4號管，混勻
7． 將1至5號管放進(jìn)冰槽里備用；標(biāo)準(zhǔn)管含量見下表
| 管號 | HEPENGBIO稀釋液（Reagent B） | HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C） | 標(biāo)準(zhǔn)DNA總量 |
| 1 | xx微升 | xx微升 | xx納克/毫升 |
| 2 | xx微升 | xx微升1號管 | xx納克/毫升 |
| 3 | xx微升 | xx微升2號管 | xx納克/毫升 |
| 4 | xx微升 | xx微升3號管 | xx納克/毫升 |
| 5 | xx微升 | 空對照 | 0 |
8． 移取xx微升含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）的HEPENGBIO染色工作液到新的比色皿
9． 加入100微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液
10． 室溫下，孵育5分鐘，避免光照
11． 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀測讀：獲得相對熒光單位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
12． 重復(fù)實(shí)驗步驟8至11四次
13． 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對熒光單位（RLU）；橫坐標(biāo)（X軸）為DNA含量（納克/毫升）
三、 樣品檢測
1． 移取xx微升含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO稀釋液（Reagent B）的HEPENGBIO染色工作液到新的比色皿
2． 加入100微升待測樣品
3． 室溫下，孵育5分鐘，避免光照
4． 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀測讀：獲得相對熒光單位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
5． 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)RNA含量（納克/毫升）
