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線粒體容積變化是衡量線粒體活性的基本參數(shù)。線粒體應(yīng)對細(xì)胞對于藥物、凋亡誘導(dǎo)、細(xì)胞周期變化等反應(yīng)采取的活性變化，包括膜電位、氧消耗、以及膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）功能等的改變。線粒體基質(zhì)容量（mitochondrial matrix volume）成為檢測線粒體活性和功能的指標(biāo)。一旦各種因素包括凋亡刺激、活性氧影響導(dǎo)致線粒體膜通道孔開放或膜電位的消失，而導(dǎo)致線粒體容積增大，即線粒體膨脹（mitochondrial swelling），使線粒體的光散射性（light scattering）降低，通過分光光度儀520nm波長的吸光峰值的變化，定量分析線粒體的膨脹程度。該波長區(qū)域可以避免細(xì)胞色素和蛋白質(zhì)的干擾。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO緩沖液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO膨脹液（Reagent B） 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保證6月
用戶自備
比色皿96孔板：用于線粒體光度分析的容器
分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于線粒體光度定量分析
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，開啟并設(shè)定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長520nm，間隔30秒測讀1次，持續(xù)10分鐘至30分鐘，并置零
一、 樣品膨脹度檢測
1． 準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品：對照樣品和處理樣品
2． 分別移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應(yīng)孔里
3． 分別加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻分別加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B）
7． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設(shè)定時(shí)間點(diǎn)記錄實(shí)際吸光值
8． 獲得實(shí)際吸光讀數(shù)：0分鐘讀數(shù)-10分鐘吸光讀數(shù)――實(shí)際吸光讀數(shù)高，表明線粒體膨脹度高
9． 或構(gòu)建線粒體膨脹-藥物濃度關(guān)系曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光讀數(shù)，橫座標(biāo)（X）為藥物濃度
二、誘導(dǎo)劑篩選檢測
1． 準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應(yīng)孔里
3． 加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻加入10微升用戶自備的待測誘導(dǎo)劑，混勻（注意：可以設(shè)定不同濃度梯度）
7． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設(shè)定時(shí)間點(diǎn)記錄實(shí)際吸光值――吸光值降低，表明誘導(dǎo)劑作用增強(qiáng)
8． 構(gòu)建線粒體膨脹誘導(dǎo)曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光值 ，橫座標(biāo)（X）為時(shí)間（分鐘）
9． 或構(gòu)建線粒體膨脹-誘導(dǎo)劑濃度關(guān)系曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光值，橫座標(biāo)（X）為誘導(dǎo)劑濃度
三、抑制劑篩選檢測
1． 準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔酶標(biāo)板的對應(yīng)孔里
3． 加入xx微升室溫預(yù)熱的HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 加入10微升用戶自備的待測抑制劑，混勻（注意：可以設(shè)定不同濃度梯度）
7． 動態(tài)測讀2分鐘或室溫下靜置2分鐘
8． 即刻加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B），混勻
9． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設(shè)定時(shí)間點(diǎn)記錄實(shí)際吸光值――吸光值不變，表明抑制劑作用增強(qiáng)
10． 或構(gòu)建線粒體膨脹-抑制劑濃度關(guān)系曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光值，橫座標(biāo)（X）為抑制劑濃度
產(chǎn)品信息價(jià)格說明書等相關(guān)資料，可以聯(lián)系客服咨詢索取。
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線粒體容積變化是衡量線粒體活性的基本參數(shù)。線粒體應(yīng)對細(xì)胞對于藥物、凋亡誘導(dǎo)、細(xì)胞周期變化等反應(yīng)采取的活性變化，包括膜電位、氧消耗、以及膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）功能等的改變。線粒體基質(zhì)容量（mitochondrial matrix volume）成為檢測線粒體活性和功能的指標(biāo)。一旦各種因素包括凋亡刺激、活性氧影響導(dǎo)致線粒體膜通道孔開放或膜電位的消失，而導(dǎo)致線粒體容積增大，即線粒體膨脹（mitochondrial swelling），使線粒體的光散射性（light scattering）降低，通過分光光度儀520nm波長的吸光峰值的變化，定量分析線粒體的膨脹程度。該波長區(qū)域可以避免細(xì)胞色素和蛋白質(zhì)的干擾。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO緩沖液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO膨脹液（Reagent B） 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保證6月
用戶自備
比色皿96孔板：用于線粒體光度分析的容器
分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于線粒體光度定量分析
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，開啟并設(shè)定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長520nm，間隔30秒測讀1次，持續(xù)10分鐘至30分鐘，并置零
一、 樣品膨脹度檢測
1． 準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品：對照樣品和處理樣品
2． 分別移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應(yīng)孔里
3． 分別加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻分別加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B）
7． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設(shè)定時(shí)間點(diǎn)記錄實(shí)際吸光值
8． 獲得實(shí)際吸光讀數(shù)：0分鐘讀數(shù)-10分鐘吸光讀數(shù)――實(shí)際吸光讀數(shù)高，表明線粒體膨脹度高
9． 或構(gòu)建線粒體膨脹-藥物濃度關(guān)系曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光讀數(shù)，橫座標(biāo)（X）為藥物濃度
二、誘導(dǎo)劑篩選檢測
1． 準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應(yīng)孔里
3． 加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻加入10微升用戶自備的待測誘導(dǎo)劑，混勻（注意：可以設(shè)定不同濃度梯度）
7． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設(shè)定時(shí)間點(diǎn)記錄實(shí)際吸光值――吸光值降低，表明誘導(dǎo)劑作用增強(qiáng)
8． 構(gòu)建線粒體膨脹誘導(dǎo)曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光值 ，橫座標(biāo)（X）為時(shí)間（分鐘）
9． 或構(gòu)建線粒體膨脹-誘導(dǎo)劑濃度關(guān)系曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光值，橫座標(biāo)（X）為誘導(dǎo)劑濃度
三、抑制劑篩選檢測
1． 準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔酶標(biāo)板的對應(yīng)孔里
3． 加入xx微升室溫預(yù)熱的HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 加入10微升用戶自備的待測抑制劑，混勻（注意：可以設(shè)定不同濃度梯度）
7． 動態(tài)測讀2分鐘或室溫下靜置2分鐘
8． 即刻加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B），混勻
9． 即刻放進(jìn)分光光度儀或酶標(biāo)儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設(shè)定時(shí)間點(diǎn)記錄實(shí)際吸光值――吸光值不變，表明抑制劑作用增強(qiáng)
10． 或構(gòu)建線粒體膨脹-抑制劑濃度關(guān)系曲線：縱座標(biāo)（Y）為實(shí)際吸光值，橫座標(biāo)（X）為抑制劑濃度
