阿爾新藍(lán)（alcian blue）染料是一種水溶性的銅酞菁基團(tuán)（cuprophthalocyanine group）的堿性染料。由于分子中銅的存在，而呈現(xiàn)藍(lán)色。在低pH的環(huán)境下，阿爾新藍(lán)與多價(jià)陰離子硫酸化（sulfated）和羧化（carboxylated）自由基的多價(jià)陰離子反應(yīng)，例如酸性粘多糖蛋白（acidic mucopolysaccharide）、唾液粘多糖蛋白（sialomucins）以及糖蛋白，和酸性基團(tuán)形成鹽鍵（salt linkage），呈現(xiàn)（通常高碘酸希爾法陰性）藍(lán)色。高碘酸（periodic acid）可以氧化糖蛋白中的多糖（polysaccharide）糖基，包括乙二醇（1,2-glycol）中的碳原子，成為乙醛基團(tuán)（aldehyde group），與希爾試劑（Schiff’s Reagent），即品紅亞硫酸鹽染料（fuchsin sulfite）發(fā)生反應(yīng)，呈現(xiàn)品紅色（magenda）或紫紅色，表明中性粘多糖蛋白陽(yáng)性。在糖蛋白電泳上，使用高碘酸希爾法阿爾新藍(lán)染色，可以檢測(cè)到25至100納克的糖蛋白。
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO固定液（Reagent A）  250毫升
HEPENGBIO染色液A（Reagent B）   50毫升
HEPENGBIO氧化液（Reagent C）   50毫升
HEPENGBIO染色液B（Reagent D）   50毫升
HEPENGBIO還原液（Reagent E）   50毫升
HEPENGBIO保存液（Reagent F）   50毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO染色液A（Reagent B）和HEPENGBIO染色液B（Reagent D），嚴(yán)格密封瓶口，避免光照； 試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月
 
用戶自備
 
100毫升燒杯：用于配制工作液的容器
塑料盤：用于染色的容器
無(wú)離子水：用于稀釋試劑溶液
平式搖蕩儀：用于染色操作時(shí)的孵育
實(shí)驗(yàn)步驟
 
實(shí)驗(yàn)開始前，完成SDS-PAGE蛋白電泳的運(yùn)行，取出6cm X 8cm 的膠體，作好定向標(biāo)記，然后進(jìn)行下列操作：
1． 準(zhǔn)備6個(gè)100毫升的燒杯，作好1至6號(hào)標(biāo)記
2． 移取50毫升HEPENGBIO固著液（Reagent A）到1號(hào)燒杯，加入50毫升用戶自備的無(wú)離子水，充分混勻
3． 加入到8cm X 10cm 大小的染色盤
4． 將聚丙烯酰胺凝膠放進(jìn)染色盤里
5． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育30分鐘，速度為50RPM（注意：如果用戶需要暫停，可以過(guò)夜，但注意液體揮發(fā)）
6． 小心倒掉染色盤里的HEPENGBIO固著液（Reagent A）
7． 加入100毫升用戶自備的無(wú)離子水
8． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育10分鐘，速度為50RPM
9． 小心倒掉染色盤里的無(wú)離子水
10． 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟7至9一次
11． 移取10毫升HEPENGBIO染色液A（Reagent B）到2號(hào)燒杯，加入90毫升無(wú)離子水，充分混勻
12． 加入上述配制的100毫升2號(hào)燒杯里稀釋的HEPENGBIO染色液A（Reagent B）到染色盤里
13． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育60分鐘，速度為50RPM，或直至呈現(xiàn)藍(lán)色條帶為止，嚴(yán)格避免光照
14． 小心倒掉染色盤里的HEPENGBIO染色液A（Reagent B）
15． 加入100毫升用戶自備的無(wú)離子水
16． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育10分鐘，速度為50RPM
17． 小心倒掉染色盤里的無(wú)離子水
18． 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟15至17二次
19． 移取10毫升HEPENGBIO氧化液（Reagent C）到3號(hào)燒杯，加入90毫升無(wú)離子水，充分混勻
20． 加入上述配制的100毫升3號(hào)燒杯里稀釋的HEPENGBIO氧化液（Reagent C）到染色盤里
21． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育60分鐘，速度為50RPM
22． 小心倒掉染色盤里的HEPENGBIO氧化液（Reagent C）
23． 加入100毫升用戶自備的無(wú)離子水
24． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育10分鐘，速度為50RPM
25． 小心倒掉染色盤里的無(wú)離子水
26． 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟23至25二次
27． 移取10毫升HEPENGBIO染色液B（Reagent D）到4號(hào)燒杯，加入90毫升無(wú)離子水，充分混勻
28． 加入上述配制的100毫升4號(hào)燒杯里稀釋的HEPENGBIO染色液B（Reagent D）到染色盤里
29． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育60分鐘，速度為50RPM，或直至呈現(xiàn)品紅色條帶為止，嚴(yán)格避免光照
30． 小心倒掉染色盤里的HEPENGBIO染色液B（Reagent D）
31． 移取10毫升HEPENGBIO還原液（Reagent E）到5號(hào)燒杯，加入90毫升無(wú)離子水，充分混勻
32． 加入上述配制的100毫升5號(hào)燒杯里稀釋的HEPENGBIO還原液（Reagent E）到染色盤里
33． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育60分鐘，速度為50RPM，或直至背景清晰
34． 小心倒掉染色盤里的HEPENGBIO還原液（Reagent E）
35． 加入100毫升用戶自備的無(wú)離子水
36． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育10分鐘，速度為50RPM
37． 小心倒掉染色盤里的無(wú)離子水
38． 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟35至37一次（注意：條帶更加清晰）
39． 移取10毫升HEPENGBIO保存液（Reagent F）到6號(hào)燒杯，加入90毫升無(wú)離子水，充分混勻
40． 加入上述配制的100毫升6號(hào)燒杯里稀釋的HEPENGBIO保存液（Reagent F）到染色盤里
41． 室溫下，在平式搖蕩儀上孵育30分鐘，速度為50RPM，或過(guò)夜至次日處理
42． 直至完成所有拍照和分析：呈現(xiàn)藍(lán)色或紫紅色為糖蛋白陽(yáng)性條帶