肌酐(creatinine)是肌肉收縮后磷酸肌酸的分解產(chǎn)物或者是肌肉、神經(jīng)中肌酸脫水后產(chǎn)生,也是肌酸的環(huán)狀衍生物。肌酐通過血液由腎臟過濾出來,經(jīng)過尿液排泄。一旦腎臟功能缺失,血液中肌酐水平顯著增高。因此,血液和尿液的肌酐水平可以測算肌酐清除能力(creatinine clearance;CrCl),從而評價腎小球濾過率(glomerular filtration rate;GFR),反映腎功能。正常情況下,肌肉發(fā)達的人肌酐水平相對較高,而素食者肌酐水平較低。肌酐水平異常增高與腎臟損害(renal impairment)、腎炎(Nephritis)、腎病、尿路梗阻、汞中毒(mercurialism)等有關(guān);異常降低則與青少年糖尿病、懷孕和肌萎縮等有關(guān)。酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)檢測肌酐較之化學(xué)方法具有更簡便(無需預(yù)處理)、更準確(干擾性低)、高通量的優(yōu)點。基于肌酐,在堿性環(huán)境下,與苦味酸(picric acid)反應(yīng)(Jaffe 反應(yīng)),產(chǎn)生還原性桔紅色復(fù)合物,通過其終點吸收峰值的變化(492nm波長),來定量分析肌酐的含量。其反應(yīng)系統(tǒng)如下:
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO堿性液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO標準液(Reagent C) 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent A)避免光照;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月
用戶自備
恒溫培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)孵育
比色皿:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
實驗步驟
一、測定準備
1. 準備好待測樣品,置于冰槽里
2. 設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長492nm,并置零
二、 樣品測定
1. 移取xx微升HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent A)到新的比色皿
2. 加入xx微升HEPENGBIO堿性液(Reagent B),混勻
3. 加入xx微升待測樣品或HEPENGBIO標準液(Reagent C)
4. 上下傾倒數(shù)次,混勻,并同時計時30秒
5. 即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品初始讀數(shù)(30秒讀數(shù))
6. 放進37℃恒溫水槽孵育1分鐘
7. 即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品終點讀數(shù) (90秒讀數(shù))
8. 樣品實際讀數(shù)=樣品終點讀數(shù)-樣品初始讀數(shù)
三、計算樣品濃度
注意事項
1. 本產(chǎn)品為50次操作,包括標準樣品
2. 本產(chǎn)品檢測范圍在0.09毫克/分升(8微摩爾/升)至15毫克/分升(13微摩爾/升)
3. 建議使用新鮮肝素抗凝血液,在4℃冰箱可以保持24小時;暫時不予檢測,放進-80℃保存
4. 尿液樣品在4℃冰箱可以保持7天;暫時不予檢測,需放進-80℃保存,1月內(nèi)完成檢測
5. 操作時,須戴手套
6. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
7. 系統(tǒng)操作過程中,標準樣品測定只需1次
8. 試劑出現(xiàn)沉淀可以離心去除后檢測
9. 空白讀數(shù)大于1.8,則不宜使用
10. 測定值由低到高變化
11. 用戶可以使用490nm至510nm波長范圍的任一波長進行檢測
12. 比色測定后,比色皿須清洗徹底
13. 如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度;例如尿液樣品需稀釋50倍
14. 樣品中膽紅素大于55毫克/分升、血紅蛋白大于1克/升可能干擾檢測
15. 肌酐濃度換算:1毫克/分升=88.4微摩爾/升
16. 正常值參考如下
17. 建議用戶建立自己的正常值范圍
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO堿性液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO標準液(Reagent C) 微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent A)避免光照;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月
用戶自備
恒溫培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)孵育
比色皿:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
實驗步驟
一、測定準備
1. 準備好待測樣品,置于冰槽里
2. 設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長492nm,并置零
二、 樣品測定
1. 移取xx微升HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent A)到新的比色皿
2. 加入xx微升HEPENGBIO堿性液(Reagent B),混勻
3. 加入xx微升待測樣品或HEPENGBIO標準液(Reagent C)
4. 上下傾倒數(shù)次,混勻,并同時計時30秒
5. 即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品初始讀數(shù)(30秒讀數(shù))
6. 放進37℃恒溫水槽孵育1分鐘
7. 即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品終點讀數(shù) (90秒讀數(shù))
8. 樣品實際讀數(shù)=樣品終點讀數(shù)-樣品初始讀數(shù)
三、計算樣品濃度
注意事項
1. 本產(chǎn)品為50次操作,包括標準樣品
2. 本產(chǎn)品檢測范圍在0.09毫克/分升(8微摩爾/升)至15毫克/分升(13微摩爾/升)
3. 建議使用新鮮肝素抗凝血液,在4℃冰箱可以保持24小時;暫時不予檢測,放進-80℃保存
4. 尿液樣品在4℃冰箱可以保持7天;暫時不予檢測,需放進-80℃保存,1月內(nèi)完成檢測
5. 操作時,須戴手套
6. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
7. 系統(tǒng)操作過程中,標準樣品測定只需1次
8. 試劑出現(xiàn)沉淀可以離心去除后檢測
9. 空白讀數(shù)大于1.8,則不宜使用
10. 測定值由低到高變化
11. 用戶可以使用490nm至510nm波長范圍的任一波長進行檢測
12. 比色測定后,比色皿須清洗徹底
13. 如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度;例如尿液樣品需稀釋50倍
14. 樣品中膽紅素大于55毫克/分升、血紅蛋白大于1克/升可能干擾檢測
15. 肌酐濃度換算:1毫克/分升=88.4微摩爾/升
16. 正常值參考如下
17. 建議用戶建立自己的正常值范圍