脂類物質(zhì)(LIPIDS)是一類脂溶性(疏水性)的自然分子,包括脂肪酸(FATTY ACID)及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂,以及其它固醇類(STEROL)物質(zhì),例如膽固醇。脂類物質(zhì)在機(jī)體中具有能量?jī)?chǔ)存的作用,是膜結(jié)構(gòu)的組成成分和細(xì)胞信號(hào)分子。油性紅O(Oil Red O),又稱為27號(hào)紅色溶劑(Solvent Red 27)或蘇丹紅5B(Sudan Red 5B),是一種脂溶性偶氮染料(LYSOCHROME AZO DYE)。其分子式為C26H24N4O,分子量為408.51。染色顯示脂類物質(zhì)呈紅色。由于石蠟包埋的組織切片在去石蠟的過程中,有機(jī)溶劑諸如二甲苯等容易破壞和減少組織中的脂質(zhì)成分,因此使用非二甲苯類脫蠟,以最大程度保護(hù)組織中的脂質(zhì)成分是油性紅O染色的關(guān)鍵。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A) 50毫升
HEPENGBIO凈化液(Reagent B) 10毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent C) 50毫升
HEPENGBIO脫水液(Reagent D) 20毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent E) 10毫升
HEPENGBIO澄清液(Reagent F) 10毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照;有效保證3月
用戶自備
蘇木素復(fù)染試劑盒(HEPENGBIO80067):用于常規(guī)染色后復(fù)染
經(jīng)典水相封片液(HEPENGBIO12146):用于染色后封片處理
烘箱:用于石蠟切片處理
中性樹脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
一、 脫蠟處理
1. 取出待測(cè)的6微米厚的石蠟包埋的組織切片
2. 小心加上500微升HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面(注意:使用前,搖勻脫蠟液)
3. 放進(jìn)70℃恒溫培養(yǎng)箱里孵育5分鐘
4. 即刻小心移去切片上的HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A)
5. (選擇步驟)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至4一次
6. 小心加上200微升HEPENGBIO凈化液(Reagent B)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
7. 室溫下孵育2分鐘
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO凈化液(Reagent B)
9. 進(jìn)一步依次常規(guī)凈化處理:用戶自備的100%乙醇、70%乙醇、50%乙醇
10. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
11. 室溫下孵育3分鐘
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent C)
二、 樣本染色處理
1. 小心加上200微升HEPENGBIO脫水液(Reagent D),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
2. 室溫下靜置5分鐘
3. 小心抽去HEPENGBIO脫水液(Reagent D)
4. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至3一次
5. 小心加上200微升HEPENGBIO染色液(Reagent E),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
6. 室溫下靜置7分鐘;或直至可見紅色
7. 小心抽去HEPENGBIO染色液(Reagent E)
8. 室溫下,小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C)
9. 室溫下孵育2分鐘
10. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C)
三、樣本復(fù)染處理
1. 小心加上200微升HEPENGBIO澄清液(Reagent F),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
2. 室溫下孵育5分鐘
3. 小心抽去HEPENGBIO澄清液(Reagent F)
4. 小心加入200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C)
5. 室溫下孵育2分鐘
6. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C)
7. 樣本復(fù)染處理(蘇木素)
8. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:脂類物質(zhì)呈現(xiàn)紅色(如果復(fù)染則細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色)
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 建議用戶避免使用常規(guī)石蠟包埋組織切片,即石蠟包埋前避免二甲苯等透明處理
4. 染色時(shí)更換試劑溶液時(shí),保持切片面基本晾干
5. 試劑溶液在切片表面時(shí),避免有氣泡存在,同時(shí)確保鋪滿切片表面
6. 整個(gè)操作,在避光狀態(tài)下進(jìn)行
7. 樣品染色避免過度,肉眼可見紅色即可終止染色
8. 建議使用HEPENGBIO蘇木素復(fù)染試劑盒(HEPENGBIO80067),增加染色對(duì)比度
9. 染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察
10. 樣品染色后保存,避免光照
11. 封片處理,避免使用有機(jī)溶劑類包括乙醇等,而使用水相封片液;建議使用HEPENGBIO經(jīng)典水相封片液
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A) 50毫升
HEPENGBIO凈化液(Reagent B) 10毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent C) 50毫升
HEPENGBIO脫水液(Reagent D) 20毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent E) 10毫升
HEPENGBIO澄清液(Reagent F) 10毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照;有效保證3月
用戶自備
蘇木素復(fù)染試劑盒(HEPENGBIO80067):用于常規(guī)染色后復(fù)染
經(jīng)典水相封片液(HEPENGBIO12146):用于染色后封片處理
烘箱:用于石蠟切片處理
中性樹脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
一、 脫蠟處理
1. 取出待測(cè)的6微米厚的石蠟包埋的組織切片
2. 小心加上500微升HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面(注意:使用前,搖勻脫蠟液)
3. 放進(jìn)70℃恒溫培養(yǎng)箱里孵育5分鐘
4. 即刻小心移去切片上的HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A)
5. (選擇步驟)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至4一次
6. 小心加上200微升HEPENGBIO凈化液(Reagent B)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
7. 室溫下孵育2分鐘
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO凈化液(Reagent B)
9. 進(jìn)一步依次常規(guī)凈化處理:用戶自備的100%乙醇、70%乙醇、50%乙醇
10. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
11. 室溫下孵育3分鐘
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent C)
二、 樣本染色處理
1. 小心加上200微升HEPENGBIO脫水液(Reagent D),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
2. 室溫下靜置5分鐘
3. 小心抽去HEPENGBIO脫水液(Reagent D)
4. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至3一次
5. 小心加上200微升HEPENGBIO染色液(Reagent E),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
6. 室溫下靜置7分鐘;或直至可見紅色
7. 小心抽去HEPENGBIO染色液(Reagent E)
8. 室溫下,小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C)
9. 室溫下孵育2分鐘
10. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C)
三、樣本復(fù)染處理
1. 小心加上200微升HEPENGBIO澄清液(Reagent F),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
2. 室溫下孵育5分鐘
3. 小心抽去HEPENGBIO澄清液(Reagent F)
4. 小心加入200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C)
5. 室溫下孵育2分鐘
6. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C)
7. 樣本復(fù)染處理(蘇木素)
8. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:脂類物質(zhì)呈現(xiàn)紅色(如果復(fù)染則細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色)
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 建議用戶避免使用常規(guī)石蠟包埋組織切片,即石蠟包埋前避免二甲苯等透明處理
4. 染色時(shí)更換試劑溶液時(shí),保持切片面基本晾干
5. 試劑溶液在切片表面時(shí),避免有氣泡存在,同時(shí)確保鋪滿切片表面
6. 整個(gè)操作,在避光狀態(tài)下進(jìn)行
7. 樣品染色避免過度,肉眼可見紅色即可終止染色
8. 建議使用HEPENGBIO蘇木素復(fù)染試劑盒(HEPENGBIO80067),增加染色對(duì)比度
9. 染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察
10. 樣品染色后保存,避免光照
11. 封片處理,避免使用有機(jī)溶劑類包括乙醇等,而使用水相封片液;建議使用HEPENGBIO經(jīng)典水相封片液