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赫澎(上海)生物科技有限公司
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特殊石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O直接染色試劑盒
產(chǎn)品編號(hào) HPBIO-JM4761
中文名稱: 特殊石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O直接染色試劑盒
英文名稱:
脂類物質(zhì)(LIPIDS)是一類脂溶性(疏水性)的自然分子,包括脂肪酸(FATTY ACID)及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂,以及其它固醇類(STEROL)物質(zhì),例如膽固醇。脂類物質(zhì)在機(jī)體中具有能量?jī)?chǔ)存的作用,是膜結(jié)構(gòu)的組成成分和細(xì)胞信號(hào)分子。油性紅O(Oil Red O),又稱為27號(hào)紅色溶劑(Solvent Red 27)或蘇丹紅5B(Sudan Red 5B),是一種脂溶性偶氮染料(LYSOCHROME AZO DYE)。其分子式為C26H24N4O,分子量為408.51。染色顯示脂類物質(zhì)呈紅色。由于石蠟包埋的組織切片在去石蠟的過程中,有機(jī)溶劑諸如二甲苯等容易破壞和減少組織中的脂質(zhì)成分,因此使用非二甲苯類脫蠟,以最大程度保護(hù)組織中的脂質(zhì)成分是油性紅O染色的關(guān)鍵。
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A)          50毫升
HEPENGBIO凈化液(Reagent B)   10毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent C)   50毫升
HEPENGBIO脫水液(Reagent D)   20毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent E)   10毫升
HEPENGBIO澄清液(Reagent F)   10毫升
產(chǎn)品說明書    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里,避免光照;有效保證3月
 
用戶自備
 
蘇木素復(fù)染試劑盒(HEPENGBIO80067):用于常規(guī)染色后復(fù)染
經(jīng)典水相封片液(HEPENGBIO12146):用于染色后封片處理
烘箱:用于石蠟切片處理
中性樹脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
 
實(shí)驗(yàn)步驟
 
一、 脫蠟處理
 
1. 取出待測(cè)的6微米厚的石蠟包埋的組織切片
2. 小心加上500微升HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面(注意:使用前,搖勻脫蠟液)
3. 放進(jìn)70℃恒溫培養(yǎng)箱里孵育5分鐘
4. 即刻小心移去切片上的HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A
5. (選擇步驟)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至4一次
6. 小心加上200微升HEPENGBIO凈化液(Reagent B在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
7. 室溫下孵育2分鐘
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO凈化液(Reagent B
9. 進(jìn)一步依次常規(guī)凈化處理:用戶自備的100%乙醇、70%乙醇、50%乙醇
10. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
11. 室溫下孵育3分鐘
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent C
 
二、 樣本染色處理
 
1. 小心加上200微升HEPENGBIO脫水液(Reagent D,覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
2. 室溫下靜置5分鐘
3. 小心抽去HEPENGBIO脫水液(Reagent D
4. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至3一次
5. 小心加上200微升HEPENGBIO染色液(Reagent E,覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
6. 室溫下靜置7分鐘;或直至可見紅色
7. 小心抽去HEPENGBIO染色液(Reagent E
8. 室溫下,小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C
9. 室溫下孵育2分鐘
10. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C
 
三、樣本復(fù)染處理
 
1. 小心加上200微升HEPENGBIO澄清液(Reagent F),覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
2. 室溫下孵育5分鐘
3. 小心抽去HEPENGBIO澄清液(Reagent F
4. 小心加入200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C
5. 室溫下孵育2分鐘
6. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C
7. 樣本復(fù)染處理(蘇木素)
8. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:脂類物質(zhì)呈現(xiàn)紅色(如果復(fù)染則細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色)
 
 
 
注意事項(xiàng)
 
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 建議用戶避免使用常規(guī)石蠟包埋組織切片,即石蠟包埋前避免二甲苯等透明處理
4. 染色時(shí)更換試劑溶液時(shí),保持切片面基本晾干
5. 試劑溶液在切片表面時(shí),避免有氣泡存在,同時(shí)確保鋪滿切片表面
6. 整個(gè)操作,在避光狀態(tài)下進(jìn)行
7. 樣品染色避免過度,肉眼可見紅色即可終止染色
8. 建議使用HEPENGBIO蘇木素復(fù)染試劑盒(HEPENGBIO80067),增加染色對(duì)比度
9. 染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 
10. 樣品染色后保存,避免光照
11. 封片處理,避免使用有機(jī)溶劑類包括乙醇等,而使用水相封片液;建議使用HEPENGBIO經(jīng)典水相封片液
 
檢測(cè)報(bào)告(COA)
使用說明
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