間質干細胞（mesenchymal stem cell）分化產生脂肪細胞（adipocyte）、成骨細胞（osteoblast）、肌細胞（myocyte和軟骨細胞（chondrocyte）。軟骨細胞及其細胞外基質（extracellular matrix）構成軟骨組織（cartilage tissue），其含有硫酸軟骨素（chondroitin sulfate）和硫酸角質素（karatan sulfate）等為主要成分的蛋白多糖（proteoglycan）聚糖（aggrecan），成為軟骨生成（chondrogenesis）的標記（indicator）。甲苯胺藍（toluidine blue）是一種異染性（metachromatic）陽離子堿性染料，使軟骨組織細胞中的酸性蛋白聚糖（proteoglycan）染色，呈現(xiàn)紫藍色。
 
產品內容
 
HEPENGBIO脫蠟液（Reagent A）         300毫升（自備）
HEPENGBIO補水液A（Reagent B）  XX毫升
HEPENGBIO補水液B（Reagent C）  XX毫升
HEPENGBIO補水液C（Reagent D）  XX毫升
HEPENGBIO補水液D（Reagent E）  XX毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent F）  XX毫升
HEPENGBIO酸性液（Reagent G）  XX毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent H）  XX毫升
產品說明書    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO染色液（Reagent H），避免光照；試劑具有腐蝕性，注意操作安全。有效保證3月
 
用戶自備
 
小型染色缸：用于石蠟切片的脫蠟操作
光學顯微鏡：用于組織細胞染色后觀察分析
 
實驗步驟
 
一、 脫蠟處理
 
1． 取出10片待測的石蠟包埋的組織切片（注意：石蠟包埋前，組織切片須用10％甲醛4℃條件下，固定16小時，此步很重要）
2． （選擇步驟）放進80℃烘箱，孵育30分鐘
3． （選擇步驟）室溫下靜置15分鐘
4． 按下表依次放進小染色缸里孵育
 

染色缸	孵育時間
XX毫升HEPENGBIO脫蠟液（Reagent A）	XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO脫蠟液（Reagent A）	XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO脫蠟液（Reagent A）	XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補水液A（Reagent B）	XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補水液B（Reagent C）	XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補水液C（Reagent D）	XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補水液D（Reagent E）	XX分鐘

 
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D（Reagent E）
6． 小心加上XX微升HEPENGBIO清理液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
7． 室溫下孵育5分鐘
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
二、樣本染色處理
1． 小心加上XX微升HEPENGBIO酸性液（Reagent G），鋪滿整個切片樣品表面
2． 室溫下孵育15秒
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO酸性液（Reagent G）
4． 小心加上XX微升HEPENGBIO染色液（Reagent H），鋪滿整個切片樣品表面
5． 室溫下，孵育5分鐘，避免光照
6． 小心移去切片上的HEPENGBIO染色液（Reagent H）
7． 室溫下，小心將切片置入XX毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分鐘
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
 
 
 
三、 （選擇步驟）樣本復染處理
 
1． 樣本復染處理（固綠）
2． 放上蓋玻片或封片（注意：避免使用水相封片液）
3． 即刻在一般光學顯微鏡下觀察：陽性組織細胞呈現(xiàn)紫藍色，細胞核呈現(xiàn)深藍色（如果復染：背景呈現(xiàn)淺綠色調）
 
注意事項
 
1． 本產品為50次操作
2． 操作時，須帶手套
3． 試劑具有腐蝕性，注意操作安全
4． 石蠟包埋前，組織樣品須用10％甲醛4℃條件下，固定16小時，否則造成樣品支離破碎
5． 所有操作在室溫下進行
6． 用戶可以使用二甲苯替代HEPENGBIO脫蠟液（Reagent A）
7． 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面
8． 建議使用HEPENGBIO固綠復染試劑盒（ ），增強染色對比度
9． 組織細胞染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察