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脂類物質(zhì)（LIPIDS）是一類脂溶性（疏水性）的自然分子，分為簡(jiǎn)單脂質(zhì)包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂；復(fù)合脂質(zhì)包括磷脂、糖脂、硫脂以及脂蛋白；和中性脂質(zhì)包括甘油、固醇類（STEROL）物質(zhì)，例如膽固醇。脂類物質(zhì)在機(jī)體中具有能量?jī)?chǔ)存的作用，是膜結(jié)構(gòu)的組成成分和細(xì)胞信號(hào)分子。尼羅紅染色劑（9-diethylamino-5H-benzo[alpha]-phenoxazine-5-one；Nile red）是一種親脂性的惡嗪類熒光染料。與極性脂類物質(zhì)，例如磷脂結(jié)合后，在特定激發(fā)波長(zhǎng)543nm的激發(fā)下，顯示強(qiáng)烈桔紅色熒光（散發(fā)波長(zhǎng)598nm）。其分子式為C20H18N2O2，分子量為318。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO固著液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent C） 微升
HEPENGBIO稀釋液（Reagent D） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制和樣品操作的容器
微型臺(tái)式離心機(jī)：用于懸浮細(xì)胞的操作
熒光顯微鏡：用于細(xì)胞染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒里的HEPENGBIO染色液（Reagent C）凍融，然后移出xx毫升HEPENGBIO稀釋液（Reagent D）到1.5毫升離心管，加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent C），混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為HEPENGBIO染色工作液，避免光照。然后進(jìn)行下列操作。
操作一：細(xì)胞載玻片染色
1． 取出待測(cè)的細(xì)胞載玻片
2． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在載玻片上，鋪滿整個(gè)樣品表面
3． 小心移去載玻片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
4． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO固著液（Reagent B），鋪滿整個(gè)樣品表面
5． 室溫下，孵育5分鐘
6． 小心移去載玻片上的HEPENGBIO固著液（Reagent B）
7． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗樣品表面
8． 小心移去載玻片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
9． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO染色工作液，鋪滿整個(gè)載玻片樣品表面
10． 室溫下孵育10分鐘，避免光照
11． 放上蓋玻片
12． 即刻在熒光顯微鏡下觀察：激發(fā)波長(zhǎng)543nnm，散發(fā)波長(zhǎng)598nm（磷脂類物質(zhì)呈現(xiàn)桔紅色）
操作二：24孔細(xì)胞培養(yǎng)板染色
1． 小心抽去24孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的培養(yǎng)液
2． 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗生長(zhǎng)中的細(xì)胞表面
3． 小心抽去HEPENGBIO清理液（Reagent A）
4． 小心加入xx微升HEPENGBIO固著液（Reagent B），覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
5． 在室溫下孵育5分鐘
6． 小心抽去HEPENGBIO固著液（Reagent B）
7． 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗細(xì)胞表面
8． 小心抽去HEPENGBIO清理液（Reagent A）
9． 小心加入xx微升HEPENGBIO染色工作液，覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
10． 室溫下靜孵育10分鐘，避免光照
11． 即刻在熒光顯微鏡下觀察：激發(fā)波長(zhǎng)543nnm，散發(fā)波長(zhǎng)598nm（磷脂類物質(zhì)呈現(xiàn)桔紅色）
操作三：懸浮細(xì)胞或脫離細(xì)胞染色
1． 將懸浮細(xì)胞或脫離細(xì)胞（1 X 106細(xì)胞）移入到1.5毫升離心管
2． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
3． 小心抽去上清液
4． 加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），混勻細(xì)胞顆粒群
5． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
6． 小心抽去上清液
7． 加入xx微升HEPENGBIO染色工作液，混勻細(xì)胞顆粒群
8． 室溫下孵育10分鐘，避免光照
9． 移出50微升到載玻片上，放上蓋玻片
10． 即刻在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察：激發(fā)波長(zhǎng)543nnm，散發(fā)波長(zhǎng)598nm（磷脂類物質(zhì)呈現(xiàn)桔紅色）
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為50次（細(xì)胞載玻片）和25次（1個(gè)24孔板）操作
2． 操作時(shí)，須戴手套
3． 所有操作在室溫下進(jìn)行
4． 本產(chǎn)品適合各種規(guī)格的培養(yǎng)細(xì)胞：載玻片，載玻片培養(yǎng)皿，35mm培養(yǎng)皿，和各種培養(yǎng)孔板，須相應(yīng)調(diào)整處理液：
5． HEPENGBIO染色工作液新鮮配制，即刻使用，不宜保存
6． HEPENGBIO染色液（Reagent C）的工作液使用比例：1毫升體系可以使用10微升（1：100容量比）
7． 每次更換試劑溶液時(shí)，保持樣品表面基本晾干?？諝庵辛栏蔂顟B(tài)為沒(méi)有水滴，呈濕潤(rùn)狀態(tài)，可見(jiàn)反光
8． 試劑溶液在樣品表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿細(xì)胞表面
9． 如果用戶沒(méi)有匹配的濾波器，可以使用515至560nm之間的任一激發(fā)波長(zhǎng)和590至610nm之間的任一散發(fā)波長(zhǎng)
10． 染色完成后，即刻進(jìn)行熒光顯微鏡觀察
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO固著液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent C） 微升
HEPENGBIO稀釋液（Reagent D） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制和樣品操作的容器
微型臺(tái)式離心機(jī)：用于懸浮細(xì)胞的操作
熒光顯微鏡：用于細(xì)胞染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒里的HEPENGBIO染色液（Reagent C）凍融，然后移出xx毫升HEPENGBIO稀釋液（Reagent D）到1.5毫升離心管，加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent C），混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為HEPENGBIO染色工作液，避免光照。然后進(jìn)行下列操作。
操作一：細(xì)胞載玻片染色
1． 取出待測(cè)的細(xì)胞載玻片
2． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在載玻片上，鋪滿整個(gè)樣品表面
3． 小心移去載玻片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
4． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO固著液（Reagent B），鋪滿整個(gè)樣品表面
5． 室溫下，孵育5分鐘
6． 小心移去載玻片上的HEPENGBIO固著液（Reagent B）
7． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗樣品表面
8． 小心移去載玻片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
9． 小心加上x(chóng)x微升HEPENGBIO染色工作液，鋪滿整個(gè)載玻片樣品表面
10． 室溫下孵育10分鐘，避免光照
11． 放上蓋玻片
12． 即刻在熒光顯微鏡下觀察：激發(fā)波長(zhǎng)543nnm，散發(fā)波長(zhǎng)598nm（磷脂類物質(zhì)呈現(xiàn)桔紅色）
操作二：24孔細(xì)胞培養(yǎng)板染色
1． 小心抽去24孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的培養(yǎng)液
2． 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗生長(zhǎng)中的細(xì)胞表面
3． 小心抽去HEPENGBIO清理液（Reagent A）
4． 小心加入xx微升HEPENGBIO固著液（Reagent B），覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
5． 在室溫下孵育5分鐘
6． 小心抽去HEPENGBIO固著液（Reagent B）
7． 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗細(xì)胞表面
8． 小心抽去HEPENGBIO清理液（Reagent A）
9． 小心加入xx微升HEPENGBIO染色工作液，覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面
10． 室溫下靜孵育10分鐘，避免光照
11． 即刻在熒光顯微鏡下觀察：激發(fā)波長(zhǎng)543nnm，散發(fā)波長(zhǎng)598nm（磷脂類物質(zhì)呈現(xiàn)桔紅色）
操作三：懸浮細(xì)胞或脫離細(xì)胞染色
1． 將懸浮細(xì)胞或脫離細(xì)胞（1 X 106細(xì)胞）移入到1.5毫升離心管
2． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
3． 小心抽去上清液
4． 加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），混勻細(xì)胞顆粒群
5． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心1分鐘，速度為300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
6． 小心抽去上清液
7． 加入xx微升HEPENGBIO染色工作液，混勻細(xì)胞顆粒群
8． 室溫下孵育10分鐘，避免光照
9． 移出50微升到載玻片上，放上蓋玻片
10． 即刻在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察：激發(fā)波長(zhǎng)543nnm，散發(fā)波長(zhǎng)598nm（磷脂類物質(zhì)呈現(xiàn)桔紅色）
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為50次（細(xì)胞載玻片）和25次（1個(gè)24孔板）操作
2． 操作時(shí)，須戴手套
3． 所有操作在室溫下進(jìn)行
4． 本產(chǎn)品適合各種規(guī)格的培養(yǎng)細(xì)胞：載玻片，載玻片培養(yǎng)皿，35mm培養(yǎng)皿，和各種培養(yǎng)孔板，須相應(yīng)調(diào)整處理液：
| 操作容器 | 建議操作體系 |
| 載玻片 | 200微升 |
| 載玻片培養(yǎng)皿 | 1毫升 |
| 35mm培養(yǎng)皿 | 1毫升 |
| 96孔培養(yǎng)板 | 100微升 |
| 48孔培養(yǎng)板 | 200微升 |
| 24孔培養(yǎng)板 | 400微升 |
| 12孔培養(yǎng)板 | 1毫升 |
| 6孔培養(yǎng)板 | 2毫升 |
| 25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 3毫升 |
6． HEPENGBIO染色液（Reagent C）的工作液使用比例：1毫升體系可以使用10微升（1：100容量比）
7． 每次更換試劑溶液時(shí)，保持樣品表面基本晾干?？諝庵辛栏蔂顟B(tài)為沒(méi)有水滴，呈濕潤(rùn)狀態(tài)，可見(jiàn)反光
8． 試劑溶液在樣品表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿細(xì)胞表面
9． 如果用戶沒(méi)有匹配的濾波器，可以使用515至560nm之間的任一激發(fā)波長(zhǎng)和590至610nm之間的任一散發(fā)波長(zhǎng)
10． 染色完成后，即刻進(jìn)行熒光顯微鏡觀察
檢測(cè)報(bào)告（COA）
MSDS查詢
