在蛋白純化和融化過程中,特別是包涵體蛋白,變性劑(denaturant)提供了最有效的手段,其獲得的純化蛋白屬于變性蛋白(denatured protein)。為了使變性蛋白恢復為天然蛋白(native protein),即具有蛋白質的自然結構和活性,需要進行蛋白復性(renaturation)或重新折疊(refolding)。蛋白復性是一個復雜的過程,諸如pH、離子強度、低分子添加劑、氧化還原電位(redox potential)和溫度等物化因子,影響體外蛋白復性的效率。通常體外復性的方法包括稀釋法和緩沖交換法。前者通過化學處理,而后者采用物理方法(例如透析、膜過濾(diafiltration)、凝膠過濾層析(gel-filtration chromatography)等,以達到蛋白復性的效果。物理透析具有自然復性,減少化學干擾。
產品內容
HEPENGBIO透析液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO透析袋 個
產品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里, 避免光照,有效保證3月
用戶自備
2升燒杯:用于樣品保存的容器
4℃冰箱:用于反應孵育
實驗步驟
1. 準備好可溶性純化變性蛋白樣品
2. (選擇步驟)加入適量的HEPENGBIO透析液(Reagent A)調整蛋白濃度到1毫克/毫升
3. 移取xx毫升蛋白樣品到HEPENGBIO透析袋或自備透析袋(注意:確保封閉,沒有滲漏)
4. 放入2升燒杯中
5. 加入xx毫升HEPENGBIO透析液(Reagent A)
6. 放進4℃環(huán)境中,磁力攪拌16小時(注意:4小時后可以更換一次透析液)
7. 收集樣品(注意:用戶可以使用新鮮的HEPENGBIO透析液(Reagent A)或自備蛋白稀釋液進行稀釋處理)
8. (選擇步驟)移取100微升進行生物檢測,例如蛋白功能或活性:比色法、HPLC、受體結合實驗等確定復性蛋白活性值
9. 即刻放進-70℃冰箱里保存
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2. (選擇步驟)加入適量的HEPENGBIO透析液(Reagent A)調整蛋白濃度到1毫克/毫升
3. 移取xx毫升蛋白樣品到HEPENGBIO透析袋或自備透析袋(注意:確保封閉,沒有滲漏)
4. 放入2升燒杯中
5. 加入xx毫升HEPENGBIO透析液(Reagent A)
6. 放進4℃環(huán)境中,磁力攪拌16小時(注意:4小時后可以更換一次透析液)
7. 收集樣品(注意:用戶可以使用新鮮的HEPENGBIO透析液(Reagent A)或自備蛋白稀釋液進行稀釋處理)
8. (選擇步驟)移取100微升進行生物檢測,例如蛋白功能或活性:比色法、HPLC、受體結合實驗等確定復性蛋白活性值
9. 即刻放進-70℃冰箱里保存