測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,線粒體中 MDH 是 TCA循環(huán)的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH 在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH 分為 NAD-依賴的 MDH 和 NADP-依賴MDH, NADP-MDH 主要存在于真核細胞中。
測定原理:
NADP-MDH 催化 NADPH 還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致 340nm 處光吸收下降。