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蛋白上樣緩沖液主要由TRIS、SDS、溴酚藍、還原劑等組成。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這使蛋白質(zhì)本身的電荷完全被 SDS 掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異;SDS 還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)。還原劑可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異,最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍作為電泳指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時間。
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